金柑结合态多酚体外模拟消化产物的免疫活性研究

摘要

目的 本实验旨在研究金柑结合态多酚体外模拟消化产物的免疫活性。方法 应用体外模拟消化模型和LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型，分别采用DPPH法、ABTS法、CCK-8法、中性红比色法、Griess法以及Western blot法，以RAW 264.7细胞存活率、吞噬率和NO释放能力为指标，评价不同消化阶段和不同浓度下KNEPP的免疫活性。结果 各消化阶段KNEPP抗氧化能力与KNEPP含量呈正相关。经口腔模拟消化，KNEPP含量为（1.51±0.40）mg GAE/g DW；经胃模拟消化，KNEPP含量为（1.74±0.40）mg GAE/g DW；经小肠模拟消化后，KNEPP含量为（1.62±0.05）mg GAE/g DW。体外模拟胃和小肠消化后的KNEPP处理细胞，其细胞存活率与KNEPP浓度呈现出的剂量依赖关系，且细胞存活率高于未消化的KNEPP和模拟口腔消化后的KNEPP所处理细胞的存活率。实验表明经不同模拟消化阶段的KNEPP处理后，LPS诱导的巨噬细胞吞噬功能均显著增强，并显著抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞NO的释放量。Western blot结果表明模拟胃和小肠消化阶段的KNEPP可显著抑制IKK和IκB-α的磷酸化，同时抑制NF-κB/p65表达，从而调节LPS诱导的巨噬细胞炎症反应，发挥抗炎作用。结论 金柑结合态多酚体外模拟消化产物表现出来良好的免疫活性，这为KNEPP健康功效研究提供新的理论依据，为相关功能性产品的开发提供参考。[营养学报，2023,45（5）:465-473]