活血通督汤对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障的修复作用

摘要

目的:通过对大鼠脊髓损伤(SCI)后的行为学评分、脊髓组织病理分析以及血-脊髓屏障(BSCB)功能的评测,观察活血通督汤对大鼠SCI后BSCB的影响。方法:将24只雌性SD大鼠随机均分为假手术组、模型组及活血通督汤组,每组8只。假手术组仅咬除椎板不损伤脊髓,模型组和活血通督汤组采用改良Allen’s法建立SCI模型。分别于第1、3、5、7天行BBB评分,7 d后取材。采用HE染色观察大鼠脊髓组织受损程度,尼氏染色观察神经元形态,透射电镜观察BSCB紧密连接超微结构,EB染色检测BSCB通透性。结果:与假手术组比较,模型组和活血通督汤组相同时点BBB评分显著降低(P<0.01),在干预第7天时,活血通督汤组大鼠BBB评分显著高于模型组(P<0.05)。HE染色结果显示:与模型组比较,活血通督汤组炎症细胞浸润有所减少,神经细胞形态结构较完整且数量增多,但仍存在脊髓空洞样病变;尼氏染色结果显示:与模型组比较,活血通督汤组神经细胞形态较好且数量增多,尼氏体数量较多,空泡样改变减少,瘀血面积较小或消失;透射电镜结果显示:与模型组比较,活血通督汤组大鼠脊髓血管内皮细胞紧密连接较完整,血管管腔连续性好。激光共聚焦定性观察显示:模型组血管周围组织EB渗出明显,弥散范围较大,且固有的血管形态被弥散渗出的EB所遮盖,混为一片,较难分辨。活血通督汤组较模型组EB渗出减少,灰质区血管形态也更清晰,甚至可见少量条管状血管形态;与模型组比较,活血通督汤组脊髓组织EB含量显著降低(P<0.01),与镜下观察结果一致。结论:活血通督汤可促进血管内皮细胞间紧密连接的修复,降低BSCB的通透性,抑制血管中的炎症因子和趋化因子进入脊髓组织,为脊髓微环境的稳态提供有效保护,有利于大鼠SCI后神经细胞的再生以及运动功能的恢复。