液相芯片技术抗体修饰制备条件的优化

摘要

[目的]优化以琼脂糖水凝胶包裹的光子晶体为载体的液相芯片抗体修饰制备方法,提高抗体修饰密度及检测灵敏度。[方法]选取人Ig G作为待检靶蛋白,在琼脂糖水凝胶上首先固定羊抗人Ig G抗体,经过洗涤、封闭后,依次加入标准抗原、荧光标记的检测抗体,分别孵育、洗涤后,倒置荧光显微镜获取图像及荧光强度,根据荧光强度优化最佳琼脂糖水凝胶浓度、固定时间、氢氧化钠浓度、环氧氯丙烷浓度以及抗体浓度。[结果]在水凝胶浓度4%、Na OH浓度1.0mol/L、环氧氯丙烷浓度10%、反应时间3h、抗体浓度0.01mg/ml的条件下,荧光强度达到最强,即抗体修饰密度达到最大。[结论]该研究优化了以琼脂糖水凝胶包裹的光子晶体为载体的抗体修饰反应条件,提高了液相芯片检测的灵敏度。