1,8-桉叶油素对四氧嘧啶诱导胰岛β细胞损伤的保护作用

摘要

目的:研究1,8-桉叶油素(1,8-Cineole)对四氧嘧啶诱导胰岛β细胞NIT-1损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:利用四氧嘧啶建立NIT-1细胞损伤模型,并以1.25、2.5、5μmol/L1,8-Cineole预处理30 min。实验分为对照组、模型组和1,8-Cineole高、中、低剂量组。采用MTT法、划痕实验分别检测1,8-Cineole对NIT-1细胞损伤的存活率、划痕修复率的影响;生化法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;ELISA检测细胞上清液中胰岛素的分泌情况;Western Blot检测Bcl-2、Bax和Caspase-9蛋白的表达;机制研究进一步分为对照组、模型组、1,8-Cineole组、Z-VAD-FMK组和1,8-Cineole+Z-VAD-FMK组,采用Western Blot检测Caspase-9蛋白的表达。结果:与对照组比较,模型组细胞存活率、划痕修复率显著降低(P<0.01),上清液中SOD、CAT、GSH-Px含量以及胰岛素分泌量均显著减少(P<0.01),MDA含量显著增加(P<0.01),Bax、Caspase-9蛋白表达显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01)。加入1,8-Cineole预处理后,低、中、高剂量组能显著提高细胞存活率(P<0.05,P<0.01),高、中剂量组能提高划痕修复率(P<0.05),高剂量组SOD、CAT、GSH-Px以及胰岛素的分泌显著增加(P<0.01,P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05),中、高剂量组Bax、Caspase-9蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.01)。采用Caspase凋亡抑制剂Z-VAD-FMK作用细胞后,Caspase-9蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论:1,8-Cineole能改善四氧嘧啶诱导的NIT-1细胞损伤,其作用机制与改善氧化应激程度和抑制细胞凋亡有关。