健骨颗粒对成骨细胞分化的影响

摘要

目的:观察健骨颗粒对成骨细胞分化过程的影响。方法:取第3代SD大鼠颅骨成骨细胞,生理盐水血清组加入生理盐水血清;含药血清组加入最佳浓度的健骨颗粒颗粒含药血清;MTT法检测最佳含药血清浓度;运用采用ELISA法检测成骨细胞OCN的表达,采用比色法测羟脯氨酸(HYP)、碱性磷酸酶(AKP),实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测核心结合因子(Cbfα1)、I型胶原(Col I)、成骨转录因子(OSX)mRNA的表达。取第4代细胞采用茜素红染色法染色矿化结节。结果:MTT法检测显示含药血清最佳浓度为20%;钙化结节观察显示含药20%组最先出现矿化结节,结节数量增多;含药血清组细胞液内OCN、AKP和HYP含量高于生理盐水血清组(P<0.05);Real-time PCR检测结果显示含药血清组Cbfα1、ColⅠ、OSX基因mRNA的相对表达水平明显高于生理盐水血清组(P<0.05)。结论:健骨颗粒含药血清能提高体外培养成骨细胞中矿化结节的数量、AKP、HYP、OCN的含量、ColⅠ、Cbfα1、OSX mRNA的表达,促进成骨细胞增殖,加快细胞分化。