全骨髓贴壁法分离培养人骨髓间充质干细胞及成骨诱导分化

摘要

目的:探讨体外分离骨髓间充质干细胞的方法及其成骨潜能。方法:应用全骨髓贴壁法分离培养人骨髓间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期及免疫表型,碱性磷酸酶及茜素红染色检测成骨能力。结果:传代后的人骨髓间充质干细胞形态均一呈成纤维细胞样。第三代骨髓间充质干细胞免疫表型CD90、CD13、CD105、CD44阳性,CD34、CD45、CD14阴性。96.47%细胞处于G0/G1期,14d、21d成骨诱导培养后碱性磷酸酶及茜素红染色阳性。结论:应用全骨髓贴壁法体外分离培养人骨髓间充质干细胞简便、经济、高效。