蛋氨酸硒通过ROS/RIP3通路抑制LPS诱导的鸡肝脏组织程序性坏死研究

摘要

为了研究蛋氨酸硒对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的程序性坏死的颉颃作用,试验随机选取200只5月龄健康伊莎褐蛋鸡分成对照组和富硒组,富硒组饲喂添加蛋氨酸硒的饲料60 d后再将每组鸡随机再分为2组,即C组、LPS组和Se组、Se+LPS组,以0.2 mg/kg剂量腹腔注射LPS建立LPS诱导的肝脏组织损伤动物模型,应用透射电镜法、H.E.染色法观察肝脏组织程序性坏死状态,实时荧光定量PCR法检测程序性坏死通路相关指标分子受体相互作用蛋白1(receptor interacting protein kinase 1,RIP1)、分子受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein kinase 3,RIP3)、混交激酶域蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)及髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核转录因子(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)mRNA的表达情况,试剂盒法检测氧化应激相关指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性或含量。结果表明:在光镜下可观察到LPS组鸡肝脏组织切片炎性细胞浸润等现象,Se+LPS组细胞结构基本完整且炎性反应减少;在透射电镜下可观察到,LPS组细胞结构破坏明显,Se+LPS组得到明显改善,细胞结构基本完整。LPS组炎症因子(NF-κB、TNF-α、MyD88)、细胞因子(IL-1β、IL-18)及程序性坏死相关基因(RIP1、RIP3、MLKL)表达量明显升高,Se+LPS组与LPS组相比明显降低,但仍高于C组和Se组;LPS组CAT、GSH-Px、SOD活力和GSH含量低于C组和Se组,Se+LPS组高于LPS组,LPS组MDA含量显著高于C组、Se组和Se+LPS组(P<0.05)。说明蛋氨酸硒可通过影响ROS/RIP3相关信号通路抑制LPS诱导的肝脏组织程序性坏死。