荆防颗粒浸膏对巨噬细胞活化的增强作用及机制研究

摘要

为探究荆防颗粒浸膏对巨噬细胞活化的增强作用及机制,该研究在RAW264.7细胞培养体系中加入荆防颗粒浸膏,然后再加入不同刺激剂处理细胞,提取RNA后使用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定多种细胞因子mRNA的转录,使用酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞上清液中细胞因子分泌量,另外提取细胞内蛋白使用免疫印迹法测定信号通路活化状态。研究发现荆防颗粒浸膏单独处理细胞不增加或轻度增加RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β、MIP-1α、MCP-1、CCL5、IP-10和IFN-β的mRNA转录,但是呈剂量依赖性显著增强R848和CpG诱导RAW264.7细胞中这些细胞因子的mRNA转录;同时荆防颗粒浸膏能够显著增强R848和CpG诱导RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-6、MCP-1和IFN-β。机制研究显示荆防颗粒浸膏对CpG诱导RAW264.7细胞中p38、ERK1/2、IRF3、STAT1和STAT3磷酸化具有显著增强作用。结果表明,荆防颗粒浸膏对R848和CpG诱导巨噬细胞活化具有选择性增强作用,其机制可能与增强MAPKs、IRF3和STAT1/3信号通路活化有关。