猪脂肪前体细胞分化过程中聚脂相关基因的表达模式

摘要

本实验采用胶原酶消化法分离猪皮下脂肪前体细胞,用含850nmol/L胰岛素和50nmol/L地塞米松的诱导培养液进行诱导,采用油红O提取法测定了细胞中的甘油三酯含量,同时采用实时定量RT-PCR方法检测了细胞分化过程中聚脂相关基因的表达。结果显示:转录因子PPARγ和C/EBPβ在诱导后12h即迅速表达,SREBP-1mRNA表达水平在诱导后12h出现显著下调,随后逐渐升高,96h达到最高水平;脂肪合成相关酶基因GPDH、FAS、ACC和LPL呈现出与SREBP-1相似的表达模式;脂肪酸转运相关基因aP2、FAT、FATP1与VLDLR的表达量随着细胞分化过程的延长而不断增加,并且与细胞内甘油三酯的含量变化高度相关。本实验结果表明,PPARγ、C/EBPβ和SREBP-1可能是调控猪脂肪前体细胞分化的关键转录因子。猪皮下脂肪组织在聚脂过程中,在分化早期可能以脂肪细胞自身合成脂肪酸为主,而后期则主要依赖细胞外脂肪酸的跨膜转运。这些结果可能有助于揭示脂肪细胞的分化调控规律。