miRNA-628-3p调控乳腺癌细胞增殖的作用及机制研究

摘要

cqvip:目的探讨miRNA-628-3p对乳腺癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法以反转录PCR(RT-PCR)方法检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231)中miR-628-3p的表达水平,检测miRNA-628-3p在MCF-7细胞中的转染效率;噻唑蓝(MTT)法检测miRNA-628-3p对MCF-7细胞增殖的影响;生物信息学对miRNA-628-3p进行靶基因预测,并通过荧光素酶报告基因实验验证,Westernblot检测过表达miRNA-628-3p对靶基因多聚腺苷酸结合蛋白互作蛋白1(PAIP1)蛋白表达水平的影响;MTT法检测抑制靶基因PAIP1表达后对MCF-7细胞增殖的影响。结果乳腺癌细胞中miRNA-628-3p的表达水平明显低于人正常乳腺上皮细胞;与空载体阴性对照组(NC)比较,miRNA-628-3p过表达组细胞增殖能力明显降低;生物信息学分析表明PAIP1是miRNA-628-3p直接作用的靶基因,荧光素酶报告基因验证了该结果,并且过表达miRNA-628-3p可以明显下调PAIP1的蛋白表达水平;抑制靶基因PAIP1的表达能抑制MCF-7细胞的增殖。结论miRNA-628-3p在乳腺癌细胞中低表达,可以通过靶向调控PAIP1的表达进而抑制乳腺癌细胞的增殖。