探讨鞘内注射siRNA-P300通过cAMP-PKA-CREB通路对神经病理性痛大鼠镇痛效果的影响

摘要

cqvip:目的基于环磷酸腺苷(cAMP)-蛋白激酶A(PKA)-反应元件结合蛋白(CREB)通路探讨P300小干扰RNA(siRNA-P300)鞘内注射对神经病理性痛大鼠镇痛效果的影响。方法60只SD大鼠分成3组:对照组、模型组、siRNA-P300组,每组20只,雌雄各半。模型组、siRNA-P300组大鼠通过结扎三叉神经建立坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型,对照组仅暴露坐骨神经,不予结扎。siRNA-P300组于造模成功第1天开始给予siRNA-P300鞘内注射(注射剂量1.0mL/100g),持续给予3周,对照组和模型组鞘内注射等体积生理盐水。实验结束后,测定大鼠机械痛阈值、热痛阈、疼痛加权评分(PIS),以及cAMP、PKA、CREB mRNA和蛋白在脊髓组织中的表达水平。结果与对照组比较,模型组、siRNA-P300组机械痛阈值、热痛阈降低,PIS升高(P<0.05);与模型组比较,siRNA-P300组机械痛阈值、热痛阈升高,PIS降低(P<0.05);与对照组比较,模型组、siRNA-P300组脊髓CAMP、PKA、CREBmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,siRNA-P300组脊髓CAMP、PKA、CREB mRNA和表达水平明显降低(P<0.05);与对照组比较,模型组、siRNA-P300组脊髓白细胞介素(IL)-2)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,siRNA-P300组IL-2、IL-6、TNF-α表达水平明显降低(P<0.05)。结论siRNA-P300鞘内注射对脊髓区神经元具有保护作用,对大鼠神经病理性痛具有镇痛效果;其机制与siRNA-P300抑制cAMP-PKA-CREB通路的激活进而抑制炎症因子IL-2、IL-6、TNF-α的表达有关。