肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体对rrPDGF-BB诱导的肝星状细胞增殖的影响及作用机制研究

摘要

目的 探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)脂质体对重组大鼠血小板衍生生长因子-BB(rrPDGF-BB)诱导的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖作用的影响及其抗肝纤维化的相关分子机制.方法 取生长状态良好的对数生长期HSC用于实验,置于CPhGs脂质体浓度为117.79、58.90、29.45、14.72、7.36、3.68、1.84、0.92和0.46 mg/L的完全培养液,求出半数抑制浓度(IC50);rrPDGF-BB刺激后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定29.45、14.72、7.36 mg/LCPhGs脂质体对HSC增殖的影响;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、工型胶原、ATF-2 mRNA的表达水平;采用Western blot法检测CPhGs脂质体对p-p38蛋白表达的影响.结果 (1)对细胞增殖的影响:对不同时间点结果分析显示,与Normal组比较,细胞培养48 h时,rrPDGF-BB组HSC细胞明显增多;CPhGs脂质体各剂量组抑制rrPDGF-BB诱导的HSC增殖作用,培养48 h效率最高;对不同浓度结果分析显示,与rrPDGF-BB组比较,不同浓度CPhGs脂质体组均可抑制rrPDGF-BB诱导的HSC-T6的增殖.(2) qRT-PCR结果:CPhGs脂质体各剂量组间比较,随CPhGs脂质体药物浓度增大,α-SMA、工型胶原和ATF-2 mRNA水平显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05),其中以CPhGs脂质体29.45 mg/L组抑制效果最明显.(3) Western blot分析结果:p-p38蛋白的表达水平在CPhGs脂质体不同浓度组表达均下降,差异有统计学意义(P＜0.05);CPhGs脂质体各剂量组间比较,p-P38蛋白随CPhGs脂质体干预剂量增大,表达水平显著下降(P＜0.05).结论 CPhGs脂质体能抑制rrP-DGF-BB诱导的大鼠HSC增殖,从而起到抗肝纤维化的作用.