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金龙胆草基因组DNA的提取及均匀设计优化RAPD反应体系

         

摘要

目的 探索金龙胆草DNA的提取并利用均匀设计方法对其RAPD反应体系进行优化.方法 比较改良SDS法和试剂盒提取法提取的DNA效果,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确立适合实验操作的最佳方法;利用两次均匀设计实验确立最佳PCR反应体系,并考察退火温度对扩增效果的影响.结果 改良SDS法较适合金龙胆草基因组DNA提取,25 μL体系中内含10xTaq reaction Buffer 2 μL、Mg2+2.5 mmol/L,dNTPs 4.5 mmol/L,Primer 3.5 μmol/L,DNA模板60 ng,Taq酶1.5U,退火温度为38.9℃.结论 改良SDS法及金龙胆草的RAPD反应体系可以用于金龙胆草的DNA分析.

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