反相高效液相色谱法同时测定人血浆中磷苯妥英、苯妥英及其主要代谢产物4'-羟苯妥英的浓度

摘要

目的 建立同时测定人血浆中抗癫痫药物磷苯妥英(FOS)、苯妥英(PHT)及其主要代谢产物4'-羟苯妥英(4'-HPPH)浓度的高效液相色谱法.方法 以盐酸普萘洛尔为内标,血浆样品100μL经20%磷酸酸化后以乙酸乙酯1 mL萃取,提取后氮气吹干,加入流动相100μL复溶,取20μL进样测定.色谱柱采用Agilent RX-C8柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温:40℃;流动相为甲醇-乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液(23:17:60),流速为1.5 mL·min-1,紫外检测波长210nm.结果 血浆内源性杂质和常用合并用药对样品测定无干扰,色谱峰分离良好.FOS、PHT、4'-HPPH的线性范围分别是1～400,0.5～50和0.5～10 mg·L-1,相关系数(r)均大于0.9991.平均方法回收率为92.79%～107.90%.各组分的日内、日间RSD均小于8%.结论 该方法具有良好的准确性、精密性和灵敏性,且操作快速、简便,各组分之间分离良好,适用于临床血药浓度的监测.