多重引物PCR测序方法分析河北青县乙肝HBsAg阳性者的S基因特点

摘要

目的 分析河北青县地区乙肝HBsAg阳性者的S基因特点.方法 乙肝血清标志物酶联免疫检测试剂检测乙肝五项血清标志物,乙肝荧光PCR核酸定量试剂检测HBV病毒载量,利用多重PCR的方法,扩增乙肝S基因,序列分析其基因型、血清型特点,并分析不同标志物组合中乙肝病毒载量变化.结果 在101份乙肝HBsAg阳性者中,主要有4种血清学模式:A(HBsAg+,HBeAg-,HBeAb-,HBcAb+)、B(HBsAg+,HBeAg-,HBeAb+,HBcAb+)、C(HBsAg+,HBeAg+,HBeAb-,HBcAb+)和D(HBsAg+,HBeAg+,HBeAb-,HBcAb-),比例分别为15.8％ (16/101)、50.5％(51/101)、28.7％ (29/101)和5.0％ (5/101).荧光定量PCR法HBV核酸阳性率为86％ (87/101),多重PCR方法的核酸阳性率为94％ (95/101),两者无显著统计学意义(x2=3.55,P＞0.05).A、B、C和D血清学模式的病毒载量分别为:1.6×104、8.5×102、1.8×10 7和1.5×108 IU·mL1.该地区以C基因型为主占91％ (86/95),B基因型仅9％(9/95);血清型以adr为主占80％ (76/95),adw血清型19％ (18/95),ay血清型1％ (1/95).不同血清学模式下乙肝的基因型和血清型分布没有显著差异,血清模式e抗原阳性人群的病毒载量显著高于e抗原阴性人群,e抗原阳性人群的年龄低于e抗原阴性人群(P＜0.01).结论 多重PCR方法与荧光定量PCR方法的灵敏度相当,可以用于乙肝的S基因序列分析,青县地区C基因型乙肝病毒占绝对优势,应引起重视.