微小膜壳绦虫感染对ICR小鼠小肠LY6A(Sca-1)及IFN-γ、STAT1表达的影响

摘要

目的 探讨微小膜壳绦虫感染ICR小鼠小肠组织中LY6A及IFN-γ、STAT1的表达情况.方法 采集微小膜壳绦虫成虫标本并收集虫卵制作悬液.将ICR小鼠随机分为对照组和实验组,实验组以定量1000个/只虫卵灌胃感染,于感染后第2d和第8d按照编号处死小鼠获取小肠组织.采用HE染色进行小肠组织病理学观察,RT-PCR技术检测LY6A、IFN-γ和STAT1的mRNA相对表达量,免疫组织化学技术检测小肠中LY6A蛋白阳性细胞的表达,并用PRM技术对LY6A蛋白和STAT1蛋白进行相对丰度定量.结果 HE染色结果显示感染后第8d在肠腔内发现成虫节片,并且虫体寄生处出现急性炎症反应.RT-PCR检测显示感染第2d实验组LY6A(t=12.57,P＜0.001)和STAT1(t=12.13,P＜0.001)的mR-NA相对表达量低于对照组,而IFN-γ的mRNA相对表达量高于对照组(t=7.78,P＜0.01);感染后第8d实验组LY6A(t=10.01,P＜0.001)和STAT1(t=11.19,P＜0.001)的mRNA相对表达量高于对照组;而IFN-γ的mRNA相对表达量低于对照组(t=26.47,P＜0.001).免疫组化结果显示感染后第2d实验组LY6A阳性细胞百分比高于对照组(t=4.26,P＜0.01),感染后第8d实验组LY6A蛋白阳性细胞百分比高于对照组(t=8.18,P＜0.001).PRM检测结果显示感染后第2d实验组LY6A蛋白相对表达量低于对照组(t=6.55,P＜0.05),实验组STAT1蛋白与对照组相比无统计学差异,感染后第8d实验组LY6A蛋白(t=4.95,P＜0.05)和STAT1(t=2.91,P＜0.05)蛋白的相对表达量均高于对照组.结论 微小膜壳绦虫感染ICR小鼠小肠后LY6A(Sca-1)的mRNA水平和蛋白水平在幼虫侵入早期呈低表达,成虫期呈高表达;IFN-γ对LY6A的表达不起主导作用,而STAT1可能对LY6A(Sca-1)的表达起诱导作用.