副鸡禽杆菌外膜囊泡的生物学活性分析

摘要

为研究副鸡禽杆菌(Apg)外膜囊泡(OMVs)的生物活性,提取了A型副鸡禽杆菌的外膜囊泡.纯化后的OMVs用透射电镜观察其形态结构;将OMVs加入到鸡巨噬细胞(HD-11)培养液中,检测一氧化氮(NO)产生量的变化;用荧光定量PCR(qPCR)检测HD-11各炎症相关因子的表达量变化情况;将OMVs经肌肉注射接种SPF鸡,检测鸡血清IgG抗体产生情况,并用3种血清型的副鸡禽杆菌强毒菌株攻击免疫鸡,测定其免疫保护率.结果 显示,电镜下的副鸡禽杆菌OMVs呈球形,直径在20 ～ 300 nm;OMVs可极显著提高HD-11中NO产量;qPCR结果显示,OMVs作用可显著上调鸡巨噬细胞IL-2、IL-6、IL-1β、IL-10、iNOs等炎症相关因子的表达.免疫鸡可以产生特异性的IgG抗体.用A型副鸡禽杆菌攻毒,免疫保护率为70％,对异种血清型交叉保护性较弱,仅有10％ ～ 30％.本研究为深入研究副鸡禽杆菌外膜囊泡的功能奠定了基础.