鹿出血性肠炎病原菌的分离和鉴定

摘要

通过对死于出血性肠炎的圈养鹿的病原菌进行分离鉴定,为研制产气荚膜梭菌β-毒素单价和多价疫苗奠定基础.采集山西省内不同地区鹿场因出血性肠炎而死亡鹿的病料32例,经病原微生物分离培养、生化试验和血清型鉴定,分离得到C型产气荚膜梭菌,并测定分离菌所产毒素对小鼠的最小致死量.PCR扩增C型产气荚膜梭菌β-毒素基因,构建重组质粒pMD 18-T-J28-C,进行酶切鉴定和核苷酸序列分析.结果32株分离菌中有6株是C型产气荚膜梭菌,占18.7％;其余均为A型,占81.3％.筛选出毒力最强的菌株J28-C,最小致死量(MLD)为5.0× 105 CFU/mL.PCR扩增和核苷酸序列分析表明,经PCR得到了特异性的β毒素基因片段.表明造成山西省鹿出血性肠炎的病原菌为A型和C型产气荚膜梭菌,以A型为主.