猪SIgA分泌片的分离纯化及其多克隆抗体的制备

摘要

为制备抗分泌片多克隆抗体,采用分子筛凝胶层析、离子交换层析和硫酸铵盐析法从猪初乳中分离纯化分泌片和SIgA.SDS-PAGE鉴定表明,纯化的SIgA呈现分泌片、重链和轻链三条带,大小约为70 ku;凝胶薄层扫描分析SIgA和分泌片纯度分别为90％和89％;琼脂扩散鉴定表明,SIgA和分泌片与抗分泌片单克隆抗体发生了特异反应.以纯化分泌片为抗原,制备抗分泌片多克隆抗体,琼脂扩散检测多抗的效价为1∶32.高纯度分泌片的提取及高效价抗分泌片多抗的制备为粘膜免疫研究奠定了物质基础.