间歇低氧对大鼠肠道细菌移位发生及肠系膜淋巴结结构的影响

摘要

目的观察间歇低氧对肠道细菌移位及肠系膜淋巴结（MLN）结构的影响,探索其机制。方法将成年雄性Wister大鼠24只按照随机数字表法分为实验组及对照组各12只,实验期间两组以相同条件饲养,实验组模拟睡眠呼吸暂停给予间歇低氧处理。实验开始后第2、4周的最后1天,使用20%乌拉坦按照0.7 ml/100 g剂量麻醉大鼠,剖腹后无菌方式取MLN及距回盲瓣2 cm以上的小肠组织,HE染色观察组织微观结构,MLN无菌研磨液进行病原学培养,以ELISA法检测研磨液超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化物（MDA）及活性氧（ROS）,评估氧化应激反应程度;采集中心静脉血液检测血清二胺氧化酶（DAO）,评估肠道黏膜损伤程度。结果实验组大鼠MLN及其对应小肠肠管均有损伤,随着间歇低氧时间的延长,光镜下可见:MLN生发中心数目显著减少,体积减小,皮质髓质融合加重,面积比下降,肠管组织表现出肠上皮受损严重,通透性增高,黏膜水肿,肠绒毛高度、厚度、面积及隐窝深度明显下降等。第4周实验组大鼠MLN厌氧状态下培养出产气荚膜梭菌,证实出现肠道细菌移位。第2周对照组大鼠MLN组织的ROS、SOD及MDA含量分别为（177±9）U/ml、（5.20±0.43）U/ml及（0.95±0.22）nmol/ml,第4周对照组为（176±9）U/ml、（5.19±0.43）U/ml及（0.93±0.16）nmol/ml,组间比较差异无统计学意义（P＆0.05）;第4周实验组大鼠MLN组织ROS[（284±13）U/ml]、MDA[（2.30±0.34）nmol/ml]明显高于第2周[（217±21）U/ml、（1.17±0.24）nmol/ml],差异有统计学意义（P＆0.05）,但SOD变化情况不明显[（5.98±0.43）、（5.99±0.43）U/ml,P＆0.05];与对照组相比,实验组大鼠MLN组织ROS、SOD及MDA含量均较同周期对照组大鼠有明显升高（P＆0.05）。实验组大鼠在第2、4周血清DAO水平均高于对照组（P＆0.05）。提示实验组大鼠肠道黏膜损伤程度较对照组严重。结论低氧暴露可加重大鼠机体氧化应激反应的程度,随着间歇低氧时间逐渐延长,大鼠肠道黏膜出现严重损伤,肠道菌群移位加重对肠系膜淋巴结结构损伤,氧化应激进一步加重,进而影响肠道自身免疫功能的完整。