1,25-二羟维生素D3对被动致敏人气道平滑肌细胞的抑制作用

摘要

目的检测1,25-二羟维生素D3[1,25-（OH）2D3]对被动致敏的人气道平滑肌细胞（HASMC）的增殖及其表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和解整合素-金属蛋白酶33（ADAM33）的影响,探讨其调节支气管哮喘（简称哮喘）患者气道重塑的可能机制。方法用10%哮喘患者血清被动致敏HASMC,以10%非哮喘患者血清为对照。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同浓度1,25-（OH）2D3对HASMC细胞增殖活力的变化并确定其有效作用浓度。然后以有效作用浓度的1,25-（OH）2D3预处理HASMC,MTT法测定细胞增殖活力,流式细胞仪测定细胞周期,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法分别检测细胞中MMP-9及ADAM33的表达情况。结果 （1）1,25-（OH）2D3在(10-9～10-7)mol/L浓度下能浓度依赖性地抑制被动致敏的HASMC增殖（P＜0.05）;（2）10-7mol/L的1,25-（OH）2D3能时间依赖性地抑制被动致敏的HASMC增殖并特异性抑制细胞周期中G1/S的转化;（3）VD组MMP-9及ADAM33蛋白表达较哮喘组分别下降了（63.4±3.6）%和（50.9±2.9）%,但仍显著高于对照组（P＜0.01）;（4）VD组MMP-9及ADAM33mRNA表达较哮喘组分别下降了（52.2±2.5）%和（67.8±3.2）%,但仍显著高于对照组（P＜0.01）。结论 1,25-（OH）2D3能从多个层面抑制被动致敏的HASMC的功能,这可能是其调节哮喘气道重塑的作用机制之一。