pBBR1MCS2-Tac-EGFP广宿主载体适宜标记Ralstonia so-lanacearum

摘要

利用标记基因追踪病原菌在植物体内的入侵和定殖,是研究病原菌-寄主互作的重要手段.本研究利用电转化法将广宿主载体pBBR1MCS2-Tac-EGFP导入青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)GMI1000菌株中,获得了青枯雷尔氏菌带绿色荧光标记的转化子.转接试验结果表明,转化子的抗生素抗性和绿色荧光强度有良好的遗传稳定性.pBBR1MCS2-Tac-EGFP不影响GMI1000菌株的致病力,且EGFP蛋白能够在植物中稳定表达.灌根法接种试验结果表明,病原菌在第1天即完成对根系的侵染,并在第6天扩散至其他组织,随后造成植株萎蔫.研究结果表明所获转化子可用于后续的病原菌侵染机理等方面的研究.