龙眼生长素受体基因TIR1的克隆及表达分析

摘要

为进一步明确龙眼生长素受体基因TIR1的结构和功能,本试验采用RT-PCR和RACE-PCR对龙眼胚性愈伤组织2个TIR1基因(分别命名DlTIR1-1和DlTIR1-2)进行克隆,并进行生物信息学和表达分析.研究结果表明:DlTIR1-1全长4 343 bp,包含ORF 1 755 bp,编码584个氨基酸(GenBank登录号:KR558759),而DlTIR1-2全长2 821 bp,包含ORF 1 926 bp,编码641个氨基酸(GenBank登录号:KR558760).生物信息学分析结果表明,DlTIR1-1和DlTIR1-2理化性质较为一致,均属于不稳定蛋白,不含信号肽,具有跨膜螺旋;亚细胞定位于细胞质中,分别含有31个和45个蛋白磷酸化位点;系统进化树分析显示,DlTIR1-1与十字花科的亚麻荠和甜菜处于同一分支,而DlTIR1-2与甜橙和胡杨等木本植物保持较近的遗传距离.qPCR结果表明,DlTIR1-1和DlTIR1-2在龙眼体胚发生过程中和不同组织器官中的表达模式较为一致,且在非胚性愈伤组织、根和花中表达量最高;此外,在一定的浓度范围内,IAA、ETH、ABA和GA3均能适当提高龙眼TIR1的表达量,而添加MeJA却明显抑制TIR1的转录.上述结果表明,DlTIR1-1和DlTIR1-2可能具有相似功能,且均参与龙眼非胚性愈伤组织形成、根系分化以及花器官发育,此外龙眼生长素信号转导途径可能受多种植物激素调控.