早孕蜕膜间充质干细胞联合丹参酮ⅡA治疗大鼠宫腔粘连

摘要

背景:人早孕蜕膜间充质干细胞及丹参酮ⅡA具有抗粘连作用,均对宫腔粘连有一定疗效,但其具体机制待进一步研究.目的:探索人早孕蜕膜间充质干细胞联合丹参酮ⅡA治疗宫腔粘连的效果及机制.方法:采用胶原酶Ⅰ消化法分离培养人早孕蜕膜间充质干细胞,选取45只雌性4-6周龄SD大鼠,随机分为5组,每组9只,分别为对照组、模型组、丹参酮组、干细胞组及联合治疗组.对照组进行假手术;模型组进行机械刮宫造模后不干预;干细胞组则在造模后7 d经宫旁注射0.2 mL人早孕蜕膜间充质干细胞悬液(1×109 L-1),每隔3 d注射1次,共3次;丹参酮组在造模后7 d灌胃11 mg/(kg·d)丹参酮ⅡA溶液,持续灌胃1周;联合治疗组则为上述两种治疗方式的联合运用.对照组及模型组在术后5,10,15 d取材,各治疗组则在最后一次治疗后5,10,15 d后取材,苏木精-伊红染色、Masson染色观察受损子宫的愈合程度;ELISA检测血清雌激素E2及血管内皮生长因子水平;q-PCR法检测子宫组织中miR-29a mRNA表达;Western blot检测子宫组织转化生长因子β1、Smad3及基质金属蛋白酶9蛋白表达.结果 与结论:①与对照组比较,模型组大鼠子宫内膜纤维化面积比显著增加(P<0.05),而内膜厚度及腺体数量显著下降(P<0.05);与模型组比较,联合治疗组大鼠子宫内膜纤维化面积比显著下降(P<0.05),而内膜厚度及腺体数量显著增加(P<0.05),干细胞组及丹参酮组大鼠子宫内膜纤维化面积比也显著下降(P<0.05);②与模型组比较,丹参酮组、干细胞组及联合治疗组血清雌激素E2水平显著升高(P<0.05),血管内皮生长因子水平显著下降(P<0.05),miR-29a mRNA表达显著升高(P<0.05),联合治疗组转化生长因子β1、Smad3蛋白表达明显下降(P<0.05),丹参酮组基质金属蛋白酶9蛋白表达明显上升(P<0.05);③结果 表明,人早孕蜕膜间充质干细胞与丹参酮ⅡA联合治疗可有效修复大鼠子宫内膜,其机制可能通过调控miR-29a降低转化生长因子β1、Smad3蛋白水平,进而改善纤维化.