左归丸干预卵巢摘除骨质疏松模型小鼠骨形态发生蛋白2信号通路的变化

摘要

背景:绝经后骨质疏松症在中老年女性中属于高发疾病,严重影响其生活质量,发现并探索出一种有效的防治手段是非常必要的.中医可通过"肾主骨"理论选用补肾药治疗绝经后骨质疏松症,但其分子机制尚不清楚.目的:观察左归丸对骨形态发生蛋白2/Runx-2/Osterix信号通路的影响.方法:采用卵巢摘除的方法建立绝经后骨质疏松症小鼠模型,然后将造模成功的84只小鼠分为模型组、假手术组、雌二醇组、左归丸高、中、低(0.936,0.468,0.234 g/L)剂量组、阻断剂组,每组12只.左归丸高、中、低剂量组给予相应质量浓度的左归丸水煎液;假手术组、模型组给予等体积的生理盐水;雌二醇组给予雌二醇水溶液;阻断剂组给予ICI182780+左归丸高剂量水煎液,持续灌胃8周.采用免疫组化和Western Blot法检测左归丸干预后卵巢摘除骨质疏松症模型小鼠胫骨和股骨中骨形态发生蛋白信号通路的关键蛋白骨形态发生蛋白2、Runx-2和Osterix的表达;通过ICI182780阻断雌激素受体后,检测骨形态发生蛋白通路中蛋白表达的变化.结果 与结论:①免疫组化结果显示,与模型组小鼠相比,左归丸高、中剂量均可以明显提高模型组小鼠骨形态发生蛋白2的表达水平(P＜ 0.01,P＜0.05);左归丸高、中、低剂量组Runx-2的表达水平相比差异均有显著性意义(P＜0.01);②免疫印迹实验结果显示,与模型组小鼠相比,左归丸高、中剂量均可以明显提高模型组小鼠骨形态发生蛋白2的表达水平(P＜0.05);左归丸高、中、低剂量组Runx-2的表达水平均显著高于模型组(P＜ 0.01,P＜0.05,P＜0.05);左归丸高、中剂量组Osterix的表达水平均显著高于模型组(P＜0.01,P＜0.05);③ICI182780干预后,与左归丸高剂量组相比,阻断剂组小鼠胫骨骨形态发生蛋白2和Runx-2蛋白的表达水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);阻断剂组小鼠股骨中骨形态发生蛋白2、Runx-2和Osterix的表达水平均显著降低(P＜0.01);④提示左归丸可以通过雌激素受体激活骨形态发生蛋白2/Runx-2/Osterix信号通路进而参与骨代谢过程,实现骨保护的作用.