小鼠局灶性缺血再灌注模型的插线法试验(英文)

摘要

背景:国外小鼠局灶性脑缺血模型技术已经成熟,由于条件限制国内现多以大鼠制作脑缺血模型。目的:建立小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,以适应在基因水平进行脑缺血和再灌注损伤分子机制的研究。设计:随机对照实验。单位:承德医学院基础医学研究所。材料:实验于2002-09／2003-05在承德医学院基础研究所完成。选择 18只昆明小鼠2-3月龄,体质量20-25 g,雌雄兼用。分为假手术缎、缺血3 h再灌18 h和24 h组,每组6只。干预:通过神经病学评分,红四氮唑染色及病理形态学的观察,对造模的可靠性进行评价。选用尼龙钓丝(φ0.128mm)经过液体石蜡浸泡后, 从颈外动脉向颈内动脉插入,阻断小鼠右侧大脑中动脉3 h后,拔出线栓再灌注18 h和24 h。主要观察指标:小鼠脑梗死体积及神经学评分。结果:实验共18只小鼠均进入结果分析。①假手术组未出现神经缺损症状。②手术组小鼠神经症状表现为提尾悬空时头向左歪,左前肢内收、肩内旋,左前肢肌张力降低,不能完全伸直,自主活动时,以左后腿为圆心向左旋转,左前肢压在腹下与右前肢交叉成剪刀状,左侧肢体瘫痪更为明显,尤其是前肢,神经症状随再灌注时间延长而加重。③红四氨唑染色可清晰地显示出脑梗死范围,缺血3 h再灌18 h梗死体积为(13+2.3)mm3,缺血3 h再灌注24 h梗死体积为(16+4.5)mm3,并相对稳定,光学显微镜下可见脑缺血后的病理改变。阻断3 h再灌18,24 h 后病理损伤性改变随时间延长加重。结论:插线法制作小鼠脑缺血再灌注模型无需开颅,创伤小,缺血的部位较恒定、可以准确控制缺血和再灌注时间,此模型可做为观察脑血管疾病的病理生理改变、预后及药物治疗作用的理想实验动物模型。