生物素化葡聚糖胺法顺行追踪大鼠颈段脊髓小脑束神经元向小脑中央核的投射

摘要

目的:采用生物素化葡聚糖胺顺行追踪法观察大鼠颈髓投射纤维在小脑中央核中的分布情况。方法:实验于2005-03/09在首都医科大学解剖教研室完成。5只Wistar大鼠腹膜腔注射60g/L水合氯醛(5mL/kg)麻醉,打开各段脊髓相应部位的椎板,用注射针头刺破硬脊膜,暴露脊髓,通过连接在微量注射器上的微玻管(内径20～40μm)将溶于0.05mol/LTris-HCl缓冲液(pH7.6)的150g/L结合生物素的葡聚糖胺多点压力注射于一侧脊髓,每只大鼠注射至C3～6部位三四点,每点注射0.2～0.3μL,总量为0.6～1.2μL。其中2只大鼠在注射区尾侧加作脊髓外侧索横断。术后动物存活15～20d后,在60g/L水合氯醛深度麻醉下,经左心室插管至升主动脉进行灌注固定,制备连续切片,片厚50μm。其中小脑分别作矢状位和横切位切片,脊髓颈段作横切位切片。所有切片在光学显微镜下观察,观察结果用图像分析仪记录。标记终末依据Robertson的观察标准,即苔藓纤维的玫瑰花结样的结构特征。结果:①注射部位:生物素化葡聚糖胺注射部位均由深褐色密集区和棕色弥散区组成。注射部位的密集区基本限定于注射侧脊髓灰质后角基部、中间带和前角,覆盖了颈段脊髓小脑束的起始细胞。②标记终末在小脑横切片上的分布:主要分布于小脑内侧核头端背内侧、中段;在前间置核其主要分布于头端;而在后间置核的分布区集中在内侧;小脑外侧核未见标记纤维及终末。③标记终末在小脑矢状位上的分布:内侧核内侧部,中间部;少量分布于前间置核头端腹侧部;后间置核的分布区集中于尾端;外侧核未见标记终末。结论:大鼠脊髓颈段有向小脑中央核的投射,与腰髓的投射相比较,存在一定的定位关系。