抗晚期糖基化终产物受体抗体对晚期糖基化终产物引起心肌细胞胞内游离钙瞬变的影响

摘要

目的:观察抗晚期糖基化终产物受体(RAGE)抗体对晚期糖基化终产物刺激引起的体外培养乳鼠心肌细胞胞游离钙瞬间升高的影响。方法:实验于2004-07/12在南方医科大学基础部中心实验室及南方医科大学心血管内科实验室进行。①取新生1-3dSD大鼠心脏在Petridish培养皿中行原代心肌细胞培养。②培养3-5d的原代心肌细胞分为2大组,第1大组:人血清白蛋白组、AGEs-HSA组、抗RAGE抗体10,50mg/L组;第2大组:人血清白蛋白组、AGEs-HSA组、丙种球蛋白10,50mg/L组。处理组试验前用相应浓度抗体提前预孵2h。③将处理好的细胞用荧光钙离子指示剂Fluo-3/AM标记后,于激光共聚焦显微镜下观察刺激后细胞内游离钙浓度(以荧光值表示)变化。人血清白蛋白组给予人血清白蛋白200mg/L刺激,其他各组给予晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白200mg/L刺激。结果:①第1大组组间比较:AGEs-HSA组细胞荧光峰值和荧光值升高幅度均高于人血清白蛋白组[147.47±21.72,98.66±28.51;(78.47±22.94)%,(26.93±6.72)%;P均<0.05],抗RAGE抗体10,50mg/L组细胞荧光峰值和荧光值升高幅度均小于AGEs-HSA组[68.48±20.94,59.78±5.95;(-33.21±21.57)%,(1.80±7.00)%;P均<0.05]。②第2大组组间比较:AGEs-HSA组和丙种球蛋白10,50mg/L组细胞荧光峰值均高于人血清白蛋白组(61.72±28.62,59.60±17.20,39.04±5.62,P<0.05),后3组间比较无差异。结论:抗RAGE抗体可以阻断晚期糖基化终产物引起的心肌细胞胞内游离钙离子浓度升高,提示晚期糖基化终产物引起心肌细胞胞内游离钙离子浓度升高是由RAGE介导的。