五种生物材料对大鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β表达的影响

摘要

背景:生物材料的免疫学研究主要包括免疫球蛋白、血清总补体及补体降解产物的血生化定量测定等方面,主要通过细胞学和组织学的检测手段,其评价指标比较单一,无特异性。目的:以细胞因子(肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β)为研究对象,从mRNA水平上对5种生物材料介导的炎症反应进行相关免疫学评价。设计、时间及地点:对比观察实验,于2004-01/2005-03在上海生物材料研究测试中心完成。材料:清洁级SD大鼠3只用于原代培养大鼠巨噬细胞。阳性材料:含8%有机锡的聚氟乙烯。阴性材料:聚苯乙烯。实验材料:美国NPG黄合金块、β-磷酸三钙、固化的磷酸钙骨水泥、聚丙交酯乙交酯及聚四氟乙烯。方法:参照ISO10993-12标准,用RPMI-1640按1g/5mL比例,37℃72h制备材料的浸提液。将大鼠腹腔巨噬细胞分别给予脂多糖刺激和无脂多糖刺激,脂多糖的终浓度为1.0mg/L,再用不同生物材料的浸提液予以刺激,作用2h后收集细胞,进行反转录-聚合酶链反应检测。主要观察指标:大鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的表达强度。结果:未经脂多糖诱导的大鼠腹腔巨噬细胞与阳性材料及聚四氟乙烯、NPG接触后肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的表达均高于阴性材料,差异均有非常显著性意义(P0.05),白细胞介素1β的表达高于阴性材料,差异有显著性意义(P0.05)。经脂多糖诱导的大鼠腹腔巨噬细胞与阳性材料及聚四氟乙烯、NPG、聚丙交酯乙交酯、β-磷酸三钙及固化的磷酸钙骨水泥接触后肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的表达均高于阴性材料,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β是在分子水平上衡量不同生物材料诱导免疫刺激反应的理想指标。聚四氟乙烯和NPG的生物相容性程度较差,β-磷酸三钙和固化的磷酸钙骨水泥的相容性较好,尤其是固化的磷酸钙骨水泥。