背景:如何使生长因子安全的在体内稳定持久的表达,并获得长期的促血管生成效应是亟待解决的问题,这就需要一个良好的药物缓释系统,即可控释的生物模拟系统。目的:探讨不同配伍的生物膜对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响,寻找最佳的组合方式。设计、时间及地点:生物材料学体外观察,于2008-06/2009-05在江苏省中医院中心实验室完成。材料:通过交联剂将肝素、中药与Ⅰ型胶原发生共价结合,然后rhVEGF165、碱性成纤维细胞生长因子与肝素发生生理性结合,将血管生成素1制成微球均匀植入生物膜内,即为实验所需生物膜。方法:将制备的生物膜置于正对观察窗的鸡胚绒毛尿囊膜表面的血管最少处,然后贴在鸡胚绒毛尿囊膜表面上,封口膜封闭假气室,继续孵育。实验组在给予生物膜基础上,依次加入0,10,50,100ng碱性成纤维细胞生长因子,从中筛选出最显著促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的组合作为生物膜1;再依次加入100μL丹参注射液、黄芪注射液、三七总甙注射液、川芎嗪注射液,同法筛选出生物膜2;再依次加入10,50ng血管生成素Ⅰ,同法筛选出生物膜3作为实验最终结果。同时设立空白对照组,鸡胚绒毛尿囊膜表面未贴生物膜,仅加入PBS。加药7d后取绒毛尿囊膜,拍摄给药部位,采用Image Pro Plus 5.0.2进行数据收集。主要观察指标:不同配伍的生物膜对血管新生面积的影响。结果:①与空白对照组比较,生物膜+0,10,50,100ng碱性成纤维细胞生长因子各组新生血管面积均明显增加,其中生物膜+100ng碱性成纤维细胞生长因子组增加幅度最高(P<0.01),为此将其选为生物膜1。②与生物膜1组比较,生物膜1+三七总甙注射液组、生物膜1+川芎嗪注射液组无明显变化,生物膜1+丹参注射液组、生物膜1+黄芪注射液组新生血管面积分别增加25.48%,63.21%(P均<0.01),因此将生物膜1+黄芪注射液组作为生物膜2的最佳组成。③与生物膜2组比较,生物膜2+10ng血管生成素Ⅰ组新生血管面积无明显差异;生物膜2+50ng血管生成素Ⅰ组新生血管面积增加21.49%(P<0.05),因此将其作为生物膜3。结论:在实验制备的生物膜基础上,加入100ng碱性成纤维细胞生长因子、100μL黄芪注射液组、50ng血管生成素Ⅰ的组合,具有明显促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用。
展开▼
