在5-杂氮胞苷诱导下人脐带间充质干细胞生物活性特性及向心肌样细胞的分化

摘要

背景：人脐带间充质干细胞属于一类特殊的干细胞,该类细胞数量有限,且分离、纯化难度系数较大,并且临床上对于该类细胞生物学特性缺乏认识。目的：研究人脐带间充质干细胞的生物活性特性,探讨人脐带间充质干细胞向心肌样细胞分化的作用。方法：无菌采集剖宫产新生儿脐带,在胶原酶Ⅱ下进行消化,采用组织块培养法分离人间充质干细胞。利用免疫细胞化学染色检测细胞表面标志,观察细胞形态学特性,并采用MTT法检测细胞增殖绘制其生长曲线,将获得的人脐带间充质干细胞进行培养,待细胞生长到70%-80%融合时,采用10μmol/L5-杂氮胞苷进行24 h诱导。结果与结论：（1）组织块贴壁法培养1周后：可见人脐带间充质干细胞,去组织块加入培养液培养后,人脐带间充质干细胞集落生长;（2）第3代及第10代人脐带间充质干细胞接种24 h内：细胞为潜伏期,此后呈对数生长,倍增时间为30 h;（3）免疫细胞化学染色结果显示：第3代细胞90%以上表达基质细胞相关表面标志物CD44、CD29等,不表达造血及内皮细胞标志物CD28、CD31;（4）人脐带间充质干细胞诱导3周后：细胞突起消失,出现不规则形状,诱导4周后呈现圆形,且表达心肌特异性免疫标志物。（5）结果提示人脐带间充质干细胞具备较强的增殖能力：分离的细胞具备充质干细胞的基本生物学特性,能够在5-杂氮胞苷诱导下分化为心肌样细胞。