组织工程化椎间盘构建及其生物学评定

摘要

目的探讨人骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）经诱导转化为人髓核细胞（NPs）并构建组织工程椎间盘的价值。方法体外培养胎儿NPs及BM-MSCs并种植在聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物（PLGA）支架上,倒置显微镜及扫描电镜进行形态学观察。将载有BM-MSCs和NPs的PLGA支架及BM-MSCs和NPs的细胞悬液植入新西兰大白兔椎间盘中,12周后对椎间盘信号强度按Thompson分级进行评定。分光光度法检测蛋白聚糖并免疫组化检测Ⅱ型胶原的表达。结果 BM-MSCs在与NPs共培养后由梭形、多角形变为成纤维细胞样,且两种细胞在PLGA支架表面贴附,形态正常,生长良好;载有BM-MSCs和NPs的PLGA支架在椎间MRI信号维持、蛋白多糖[PLGA支架组含量为（3.93±0.31）mg/100 mg,对照组为（3.52±0.26）mg/100 mg]及Ⅱ型胶原表达上较对照组差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论共培养可促使BM-MSCs向NPs转化,PLGA支架为细胞提供良好的生长环境,其力学性能维持和空间结构保障可以满足BM-MSCs与NPs构建组织工程椎间盘的需要,有效延缓了椎间盘的退变。