热休克蛋白70通过激活TLR4/MyD88/NF-κB通路参与肠道炎症

摘要

目的:研究热休克蛋70(HSP70)参与肠道炎症的相关作用机制。方法:将不同慢病毒处理的Caco-2细胞分为HSP70过表达组、HSP70过表达阴性对照组、HSP70低表达组、HSP70低表达阴性对照组和空白对照组。脂多糖(LPS)刺激模拟炎症环境,用Western blotting、逆转录定量聚合酶链反应及ELISA法测定TLR4/MyD88/NF-κB信号通路中各关键蛋白和细胞因子的表达量及含量,并利用EdU比色法测定细胞增殖率。结果:LPS刺激24 h,各组Caco-2细胞中白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的mRNA表达量和蛋白含量较相应未加LPS组均有明显上升(P<0.05);与低表达组相比,HSP70过表达组的IL-1β和TNF-α的mRNA表达量分别为其1.87和1.94倍,蛋白含量分别为其1.77和1.57倍,HSP70、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达量为其1.86、1.96、2.12、1.69倍,mRNA相对表达量为6.05、2.98、3.02、2.46倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS刺激后,HSP70过表达组细胞的增殖率为过表达阴性对照组的1.64倍,HSP70低表达组为低表达阴性对照组的0.68倍(P<0.05);与低表达组相比,HSP70过表达组的细胞增殖率为其2.14倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:热休克蛋白70可以通过上调TLR4/MYD88/NF-κB通路促进IL-1β、TNF-α等细胞因子生成,参与肠道炎症的发生和发展,并促进肠道细胞的增殖。