CP和NCP型牛病毒性腹泻病毒腹腔注射小鼠感染模型的建立

摘要

为了建立不同生物型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)小鼠的急性感染模型,本研究将0.4 mL 104TCID50/mL致细胞病变型(CP型)BVDV NADL株和非致细胞病变型(NCP型)BVDV NY-1株分别经腹腔注射BALB/c小鼠,观察10 d,分别在感染后第4 d、7 d、10 d每组分别采集3只小鼠的血液、粪便后迫杀,无菌采集其心、肝、脾、肺、肠等组织样品分别进行相应检测。采集血液的血常规检测结果显示,与对照组相比,感染后第4 d、7 d和10 d,CP组和NCP组小鼠的白细胞、淋巴细胞和血小板数量均下降,在第7 d下降最明显;且感染后第7 d、10 d CP组小鼠的上述指标均低于NCP组。各组织、血液和粪便的荧光定量PCR检测结果显示,CP组小鼠在上述3个时间点血液中BVDV的载量均保持较高水平。感染后第7 d CP组和NCP组小鼠各组织中均能检测到病毒,其中血液中的病毒载量最高,对照组小鼠各组织均未检测到相应病毒。免疫组化检测感染后第7 d各组织中BVDV抗原的分布,结果显示,感染后第7 d CP组和NCP组小鼠各组织中均检测到了BVDV抗原,对照组小鼠则均未检测到相应抗原。各组小鼠的组织病理学观察结果显示,CP组小鼠十二指肠肠腺上皮细胞变性坏死脱落、间质疏松水肿和炎性细胞浸润,肝脏肝细胞肿胀、空泡变性和坏死,脾脏间质疏松水肿;NCP组小鼠十二指肠黏膜上皮细胞变性、坏死、脱落,肝脏肝血窦可见淋巴细胞炎性浸润,脾脏淋巴细胞变性和坏死,对照组小鼠各组织均无明显病理变化。本研究结果表明CP型BVDV的致病性强于NCP型BVDV,且建立了两种不同生物型BVDV急性感染的小鼠模型,为BVDV疫苗的研制和致病机理的研究奠定基础。