猪细小病毒Eva Green荧光定量PCR检测方法的建立

摘要

为建立猪细小病毒(PPV)的快速检测方法,本研究设计了一对针对PPV VP2基因的特异性引物,建立了检测PPV的Eva Green荧光定量PCR方法,并对其反应条件进行优化.结果表明该方法在104拷贝/μL～108拷贝/μL浓度范围内有良好的线性关系;病毒最低检出量为50拷贝/μL,敏感性比常规PCR电泳检测高约100倍;与猪伪狂犬、猪圆环和猪瘟病毒等不发生交叉反应;批内及批间变异系数均小于5％.该方法可以用于PPV的定量检测或临床样品的快速检测.