脂肪来源干细胞对兔皮肤组织扩张速率的影响

摘要

目的探讨在兔皮肤组织扩张过程中,通过局部皮下注射脂肪来源干细胞（ASCs）对皮肤组织扩张速率的影响。方法取新西兰大白兔脂肪,体外分离、培养ASCs,通过细胞免疫荧光表面标志物对其鉴定,并用Ed U染色标记ASCs。采用随机数字表法将20只新西兰大白兔分为实验组（n=10）和对照组（n=10）,于脊柱一侧文出1.5 cm×1.5 cm方形区域,并在其下置入30 ml圆形扩张器1枚。实验组于扩张皮下注射ASCs悬液1 ml;对照组仅注射无血清DMEM培养基1 ml,恒压条件下定期注水并记录每次注水量,分别于第7、14、28天对扩张皮肤方形区域的面积进行测量,4周完成扩张。对2组扩张皮肤方形面积予以测量并进行统计学分析。切取扩张皮肤组织,行常规石蜡组织切片并对其行HE染色;采用免疫组织化学染色检测血管内皮细胞标记物CD31表达情况,并对其微血管密度进行判定;行ELIAS法检测其表皮生长因子（EGF）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达量;采用Western Blot对其表皮细胞特异性因子（CK19）行定性检测。结果实验组扩张皮肤厚度增加明显,且其扩张速率明显快于对照组（P＜0.05）;免疫组织化学染色显示,实验组CD31阳性区域表达量增多,微血管密度明显增加（P＜0.05）;ELISA法测得实验组EGF和VEGF的表达增多（P＜0.05）;Western Blot结果显示,相对于对照组,实验组CK19表达量明显增加。结论脂肪来源干细胞能够促进扩张皮肤新生血管生成及组织再生,在很大程度上提高了皮肤组织的扩张速率,可获得更大面积的皮肤组织。