中药津力达颗粒通过提高棕色脂肪活性改善高脂饮食喂养小鼠的代谢紊乱

摘要

目的激活棕色脂肪组织(BAT)产热有助于能量消耗,这对于肥胖和2型糖尿病(T2DM)的治疗具有重要的意义。本研究旨在系统探讨中药津力达(JLD)颗粒能否改善高脂饮食喂养C57BL/6J小鼠代谢紊乱状态及增加小鼠BAT活性。方法将5~6周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后,根据体重将小鼠随机分为2组(n=15),即高脂饲料对照组(HFD)和高脂饲料加津力达组(HFD+JLD)。HFD+JLD组小鼠在给予高脂饲料的同时每天给予津力达(3.8 g·kg^-1)灌胃。HFD组小鼠给予同等剂量的0.5%羧甲纤维素钠溶液(CMC)。各组小鼠均每日灌胃1次,连续灌胃15周。检测体质量、血生化指标、组织形态学改变、葡萄糖耐量试验(IPGTT)及胰岛素耐量试验(ITT)等以明确JLD对代谢紊乱的干预作用。通过冷冻试验、实时PCR(qRT-PCR)、免疫组化及蛋白质印迹等方法来评估JLD对BAT功能的干预作用。结果体质量、体脂含量及进食量的数据结果表明,与HFD组相比,JLD能够明显抑制高脂饮食诱导的小鼠体质量增加(P<0.01),减轻体脂含量(P<0.05,P<0.01),而对进食量无明显影响。白色脂肪组织HE染色结果表明,与HFD组相比,JLD可以明显减小白色脂肪细胞的体积。血生化结果显示,与HFD组相比,JLD可以明显降低血清TG、LDL-C及NEFA的含量(P<0.05,P<0.01)。IPGTT实验及GTT-AUC的结果显示,与HFD组相比,JLD能够明显降低小鼠的血糖值及AUC(P<0.05,P<0.01)。ITT实验和ITT-AUC结果显示,与HFD组相比,JLD可以明显降低小鼠的血糖值及AUC值(P<0.01)。肝脏组织切片HE染色和油红O染色结果显示,与HFD组相比,JLD能够明显抑制高脂饮食诱导小鼠的肝脂质积累。qRT-PCR结果显示,与HFD组相比,JLD可以明显降低肝组织的炎症因子TNF-α,IL-6,MCAD及MCP1的mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。冷冻实验结果显示,与HFD组相比,JLD能明显提高小鼠在寒冷刺激下的肛温(P<0.01)。棕色脂肪组织HE染色结果表明,与HFD组相比,JLD能够明显减轻棕色脂肪脂质蓄积;棕色脂肪组织免疫组化结果显示,与HFD组相比,JLD能明显增加UCP1的表达。qRT-PCR结果显示,与HFD组相比,JLD能够明显增加棕色脂肪特异性产热相关基因UCP1、PRDM16、Dio2和ELOVL3及脂肪酸氧化功能相关基因CPT1β和PPARα的表达(P<0.05,P<0.01)。qRT-PCR结果显示,与HFD组相比,JLD能够明显增加棕色脂肪组织中的线粒体含量(P<0.05)。Western印迹结果显示,与HFD组相比,JLD可明显增加棕色脂肪组织中UCP1,PGC-1ɑ及OXPHOS蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论JLD预防和改善高脂饮食诱导的C57BL/6J小鼠多种糖脂代谢紊乱可能是通过激活棕色脂肪组织的功能、增加产热和能量消耗而实现的。