背侧纹状体miR-30a在甲基苯丙胺成瘾中的作用

摘要

目的研究微RNA(miR)-30a与甲基苯丙胺强迫性用药行为的相关性,以及其参与强迫性用药的分子机制,为阐明甲基苯丙胺成瘾的神经生物学机制提供新研究线索。方法建立甲基苯丙胺诱发的大鼠被动给药和主动给药模型(2 h·d-1短时程给药训练和6 h·d-1长时程给药训练),采用RT-qPCR和Western蛋白质印迹法研究miR-30a及其靶分子在纹状体中的差异表达特征,构建慢病毒表达系统干预背外侧纹状体中miR-30a及其靶分子的表达水平研究其对行为的影响。结果 (1)在主动给药模型下,随着甲基苯丙胺用药时间延长和用药量增加,miR-30a的表达下调由NAc向dmStr和dlStr转移;在被动给药模型下也发现了相似的变化规律,提示miR-30a表达下调不依赖于学习过程;靶分子脑源性神经营养因子(BDNF)和含三核苷酸重复序列蛋白6A(TNRC6A)的表达变化与miR-30a相反;对靶分子进行生物信息学分析发现,其可能是通过介导基因表达沉默或调节突触可塑性来参与甲基苯丙胺诱发的大鼠强迫性用药行为。(2)上调大鼠背外侧纹状体miR-30a表达水平能降低甲基苯丙胺诱发的大鼠自身给药行为和总药物摄入量。(3)下调miR-30a的靶分子BDNF的表达水平能降低甲基苯丙胺诱发的大鼠自身给药行为和总药物摄入;但是下调背外侧纹状体内miR-30a的靶分子TNRC6A不改变大鼠的自身给药行为。结论背外侧纹状体miR-30a参与负性调控甲基苯丙胺诱发的大鼠强迫性用药行为;此作用是通过BDNF调节突触可塑性而不是由TNRC6A介导的基因表达沉默发挥的。