延龄草总皂苷对D-半乳糖诱导的SD大鼠心肌线粒体自噬的影响

摘要

目的 探讨延龄草苷(TST)对D-半乳糖(D-gal)诱导的大鼠心肌组织保护作用及其对心肌线粒体自噬的影响.方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、D-gal模型组(200 mg·kg-1,sc)和D-gal+TST 50,100和200 mg·kg-1组(ig给予TST,2 h后sc给予D-gal),连续给药7周.心脏取血检测血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、羟丁酸脱氢酶(HBD)和谷草转氨酶(GOT)水平;HE染色法观察大鼠心肌组织病理变化;免疫组织化学染色检测线粒体外膜结构域包含蛋白FUN141(FUNDC1)和线粒体BNIP3L膜蛋白(NIX)的定位和表达;Western印迹法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链LC3Ⅱ/Ⅰ比值(LC3Ⅱ/Ⅰ)、Beclin1、P62、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、E3泛素-连接酶活性帕金森病蛋白2(Parkin)、FUNDC1和NIX蛋白表达水平.结果 与正常对照组相比,D-gal模型组大鼠血清CK,CK-MB,LDH,HBD和GOT水平均显著升高(P<0.05,P<0.01);HE染色结果显示,D-gal模型组大鼠心肌细胞明显萎缩并伴脂肪变性;免疫组化结果显示,FUNDC1和NIX蛋白表达降低(P<0.01);Western印迹结果显示,LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin1、PINK1、Parkin、FUNDC1和NIX蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01),P62表达升高(P<0.05).与D-gal模型组相比,D-gal+TST 50,100和200 mg·kg-1组大鼠血清总心肌酶谱各项指标均显著下降(P<0.05,P<0.01),心肌损伤明显改善,LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin1、PINK1、Parkin、FUNDC1和NIX蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01),D-gal+TST 200 mg·kg-1组P62蛋白表达水平无显著性差异.结论 TST对D-gal诱导的大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与PINK1,Parkin,FUNDC1和NIX蛋白表达升高、激活线粒体自噬有关.