UPLC-MS/MS法研究黄芪甲苷对大鼠体内阿德福韦毒代动力学及肾转运的影响

摘要

目的 研究黄芪甲苷对大鼠体内阿德福韦毒代动力学的影响,并初步探究其降低阿德福韦肾蓄积的分子机制.方法 ①毒代动力学实验:12只SD雄性大鼠随机分为阿德福韦组(阿德福韦酯30 mg·kg-1)和黄芪甲苷干预组(阿德福韦酯30 mg·kg-1+黄芪甲苷30 mg·kg-1),每组6只,于ig给药后0,1,1.5,2,3,4,6,8,12和24 h经大鼠眼眶静脉丛取血,建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法测定血浆阿德福韦浓度,进行方法学验证并计算毒代动力学参数;②肾转运实验:18只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组、阿德福韦组和黄芪甲苷干预组,每组6只,盐水对照组和阿德福韦组ig给予生理盐水,黄芪甲苷组ig给予黄芪甲苷(30 mg·kg-1),连续35 d,第8天时,除生理盐水对照组ig给予生理盐水外,其余各组ig给予阿德福韦酯30 mg·kg-1,连续28 d,应用实时荧光定量PCR测定大鼠肾组织有机阴离子转运体(Oat)和多药耐药转运体(Mrp)mRNA表达水平.结果 ① 毒代动力学实验:建立了测定大鼠体内阿德福韦血药浓度的UPLC-MS/MS方法,该方法专属性强、灵敏度高且准确性好.与阿德福韦组相比,黄芪甲苷干预组大鼠血浆中阿德福韦药峰浓度(Cmax)和药时曲线下面积(AUC0-t和AUC0-∞)显著降低(P<0.01),表观分布容积(Vd)和血浆清除率(Cl)显著增加(P<0.01).② 肾转运实验:黄芪甲苷可显著降低肾中阿德福韦的浓度(P<0.01).与生理盐水组相比,阿德福韦组大鼠肾组织中Oat1和Oat3 mRNA表达明显升高(P<0.01);黄芪甲苷干预后,与阿德福韦组相比,大鼠肾组织中Oat3 mRNA表达明显降低(P<0.01),Mrp4 mRNA表达明显升高(P<0.01).结论 黄芪甲苷可改变阿德福韦的毒代动力学参数,降低阿德福韦的肾蓄积,作用机制可能与肾小管上皮细胞Oat3和Mrp4 mRNA表达有关.