聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法快速检测儿童胃黏膜中幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性

摘要

目的探索聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymophism, PCR-RFLP）分析用于快速检测儿童胃黏膜中幽门螺杆菌（helicobacter pylori, Hp）对克拉霉素耐药性的可行性。方法所有胃黏膜标本均来源于2006年9月至2007年2月本院进行胃镜检查的患儿, 从快速尿素酶试验阳性者中随机抽取39例标本。以分离培养-琼脂稀释法测定Hp对克拉霉素的最低抑菌浓度（MIC值）, 同时PCR-RFLP快速法检测23S rRNA基因突变情况, 分别计算耐药率。以琼脂稀释法为金标准, 评估PCR-RFLP法的敏感性、特异性及阳性预测值、阴性预测值。结果琼脂稀释法共检测出克拉霉素耐药Hp 13例, 敏感Hp 26例, 耐药率为33.3%。PCR-RFLP快速法检测出克拉霉素耐药Hp 14例, 敏感Hp 25例, 耐药率为35.9%。以琼脂稀释法为金标准, PCR-RFLP法的敏感性和特异性均为92.3%, 阳性预测值和阴性预测值分别为85.7%、96.0%。两种方法比较, 差异无统计学意义（χ2=0.06, P＆0.05）。Hp对克拉霉素的耐药率较本院2004年报道（16/108株）明显增高, 差异有统计学意义（χ2=6.20, P＆0.05）。结论我院就诊儿童感染Hp对克拉霉素的耐药率呈上升趋势。采用PCR-RFLP分析检测儿童胃黏膜中Hp对克拉霉素的耐药性, 操作方便快速、结果敏感可靠, 有望为Hp根除治疗选择抗生素提供依据。