苯扎氯铵制作的大鼠先天性巨结肠模型肠道菌群变化的研究

摘要

目的验证苯扎氯铵制作的大鼠先天性巨结肠模型是否存在肠道菌群变化并探索其规律。方法按随机数字表法将18只200 g左右SPF级Sprague-Dawley（SD）雌鼠随机划分为实验组和对照组, 每组各9只, 实验组采用0.1%-30 min苯扎氯铵液制作先天性巨结肠模型, 对照组用无菌生理盐水处理。分别于术后2、3、4周采集上述模型鼠狭窄段、扩张段以及对照组肠段粪菌, 提取粪菌DNA。16S rRNA V3-V4区扩增后, 利用Illumina MiSeq测序平台检测, 并进行基于OUTs的聚类分析, 门水平、属水平菌群相对丰度及多样性分析。以α=0.05为显著性水平, 采用One-way ANOVA和Bonferroni校正的事后多重检验, 或Kruskal-Wallis法进行差异性分析。结果实验组狭窄段、扩张段以及对照组肠道菌群总OUTs分别为876.33±27.21、913.00±43.51和6 193.33±1.53, 特有OUTs分别为52.00±16.46、64.67±3.78、5 375.33±60.12, 各组上述指标与对照组比较, 差异均有统计学意义（P均＆0.000 1）。实验组狭窄段、扩张段与对照组菌群ACE指数分别为1 040.15±44.2、959.30±27.95和11 923.52±36.66, Chao1指数分别为1 087.47±130.35、946.63±29.56和10 133.08±69.88, 各组上述指标与对照组比较, 差异均有统计学意义（P均＆0.000 1）。实验组狭窄段、扩张段以及对照组菌群Shannon值分别为6.46±0.52、6.50±0.37和8.18±0.01, 各组与对照组比较, 差异均有统计学意义（P均＆0.05）。对照组及实验组狭窄段、扩张段菌群门水平相对丰度较多的是厚壁菌门[（38.46±0.03）%、（72.68±6.15）%、（63.98±7.22）%]、拟杆菌门[（26.76±0.05）%、（24.91±5.98）%、（33.17±6.92）%]和变形菌门[（32.15±0.09）%、（0.70±0.30）%、（0.56±0.14）%], 除拟杆菌门外, 各组与对照组比较, 差异均有统计学意义（P均＆0.05）。实验组与对照组菌群属水平相对丰度前10的菌群比较, 差异亦有统计学意义（P均＆0.05）。结论苯扎氯铵制作的大鼠先天性巨结肠模型存在肠道菌群变化。