猪内源性逆转录病毒体外感染人胚肾细胞系HEK-293的初步研究

摘要

目的 对猪内源性逆转录病毒（PERV）体外感染人胚肾细胞系HEK 293的能力进行检测。方法 建立体外感染人胚肾细胞系HEK -293的方法,用免疫电镜的方法观察PERV粒子,聚合酶链反应（PCR）、逆转录聚合酶链反应（RT- PCR）检测与PERV共培养24h后HEK 293细胞基因组中PERV前病毒基因的整合、表达并对PERV亚型进行鉴定,激光共聚焦显微镜检测PERV -gag蛋白的表达并进行定量分析。结果 电镜下可观察到PERV的圆形病毒粒子;与PERV共培养24h后HEK -293细胞基因组中检测到PERV前病毒DNA,且mRNA也有效表达,PERV亚型为PERV -A,B型;激光共聚焦显微镜观察到PERV -gag蛋白在感染细胞HEK- 293的胞质表达,但表达量下降。结论PERV具有体外感染人胚肾细胞系HEK- 293的能力,病毒蛋白可以有效表达,因此在猪到人的异种器官移植研究中对PERV可能引起的人兽共患病进行安全性评价是极有必要的。