二膦酸盐对骨巨细胞瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用

摘要

目的观察二膦酸盐对骨巨细胞瘤细胞生长的影响。方法取10例手术切除的骨巨细胞瘤新鲜组织进行原代培养,待瘤细胞贴壁生长后分别给予5、25、50、100、200μmol/L阿仑膦酸钠、帕米膦酸二钠。作用一定时间后,用倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,末端酶标记法凋亡染色观察细胞凋亡情况,流式细胞术检测凋亡率和caspase-3表达。结果（1）二膦酸盐作用后,细胞正常形态消失,甚至发生崩解。（2）药物作用24h后,阿仑膦酸钠可以抑制细胞活性的2.79%±0.92%～31.17%±8.05%,帕米膦酸二钠为5.87%±1.94%～39.68%±9.26%;48h后,阿仑膦酸钠可以抑制细胞活性的8.68%±2.87%～46.88%±11.24%,帕米膦酸二钠为10.49%±3.26%～60.43%±13.64%;72h后,阿仑膦酸钠可以抑制细胞活性的11.13%±3.60%～49.94%±11.67%,帕米膦酸二钠为15.57%±5.86%～63.97%±16.42%。（3）药物作用48h后,阿仑膦酸钠和帕米膦酸二钠5μmol/L组的细胞凋亡率分别为16.25%±5.62%、20.48%±6.02%;50μmol/L组分别为37.20%±12.01%、42.39%±12.41%;200μmol/L组分别为47.53%±13.92%、54.67%±15.38%。（4）帕米膦酸二钠作用48h后,5、50、200μmol/L组瘤细胞的cas-pase-3活性分别为14.93%±5.04%、25.13%±7.60%、26.07%±7.49%,引起的细胞凋亡表现为时间和浓度依赖性。结论二膦酸盐可能成为治疗和预防骨巨细胞瘤复发的一个治疗方法。