雌激素下降合并铁蓄积对骨组织骨量影响的实验研究

摘要

目的探讨单纯雌激素下降和雌激素下降+铁蓄积两种状况下,小鼠骨组织骨量、成骨活性指标、原代成骨细胞代谢指标的差异。方法第一部分:将体重（25±1）g的ICR小鼠按体重区组随机化分组分为3组,每组7只:（1）去势组,模拟绝经状态;（2）高铁去势组,模拟绝经状态合并铁蓄积,该组小鼠采用"去势"后行枸橼酸铁铵腹腔注射;（3）假手术组。12周后检测指标:小鼠体重、血清铁蛋白;胫骨组织的成骨特异性转录因子（Runx2、Osterix）、骨钙蛋白（Bglap）、骨保护素、雌激素受体α、β（ER-α、ER-β）基因表达;Micro-CT分析股骨远端骨量差异。第二部分:提取新生ICR小鼠颅骨原代成骨细胞,用枸橼酸铁胺、17β-雌二醇（E2）腹腔注射干预,碱性磷酸酶染色观察成骨细胞形态,定量PCR（个PCR）检测成骨相关基因表达。结果各组小鼠体重无统计学差异;血清铁蛋白含量:高铁去势组[（324.82±38.60）μg/L]较去势组[（41.38±5.56）μg/L]及假手术组[（39.40±3.81）μg/L]升高,差异有统计学意义（2）Micro-CT的骨密度:高铁去势组[（0.902±0.064）mg/mm~3]及去势组[（0.114±0.013）mg/mm~3]较假手术组[（0.297±0.072）mg/mm~3]均下降,差异有统计学意义,高铁去势组比去势组下降更显著。（3）RT-PCR:与假手术组相比,去势组骨保护素、Runx2、Osterix、Bglap、ER-β表达降低;高铁去势组Osterix、骨保护素表达更低。（4）成骨细胞碱性磷酸酶染色显示用枸橼酸铁胺干预后细胞变小,棕色变淡;qPCR结果显示:E2升高Bglap表达,枸橼酸铁胺下调Runx2,Osterix表达水平。结论当雌激素去除时,如合并铁增加,则成骨活性指标进一步下调、骨形成进一步受到抑制。