层粘连蛋白对人视网膜母细胞瘤株基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的影响

摘要

目的研究层粘连蛋白(laminin,LN)对人视网膜母细胞瘤株(Hxo-Rb44)基质金属蛋白酶-2(matrix metallopro-teinase,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)及其mRNA表达的影响。方法在体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞株(Hxo-Rb44)内分别加入含0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/mlLN的无血清RPMI-1640培养基,培养24h后,分别利用免疫组化SP染色法和PT-PCR检测每个实验组Hxo-Rb44表达MMP-2,MMP-9及其mRNA的含量,统计学方法比较不同实验组Hxo-Rb44表达MMP-2,MMP-9及其mRNA的差异。结果视网膜母细胞瘤细胞经LN刺激后,细胞内MMP-2和MMP-9及其mRNA表达均增加,免疫组化结果显示5μg/ml、10μg/ml、20μg/mlLN处理组MMP-2和MMP-9的染色灰度值分别是178.1±11.7和167.0±15.7、147.9±13.4和140.3±12.0、114.4±13.6和104.0±10.6,和对照组相比,差异有显著性(P<0.05),且LN浓度越高,其表达越强。5μ/ml、10!g/ml、20!g/mlLN处理组的MMP-2/β-actin、MMP-9/β-actin灰度值比值分别是0.181±0.016和0.254±0.023、0.201±0.021和0.287±0.020、0.243±0.019和0.320±0.022,与对照组相比,差异均有显著性(P<0.05),且随着LN浓度增高而增高,呈明显的量效关系。结论LN可诱导视网膜母细胞瘤细胞中表达的MMP-2和MMP-9及其mRNA增加,并呈剂量依赖型。提示LN对视网膜母细胞瘤的侵袭和转移可能具有促进作用。