过氧化氢对人晶状体上皮细胞内细胞质膜微囊蛋白的影响

摘要

目的探讨过氧化氢（H2O2）对人品状体上皮细胞的细胞质膜微囊蛋白（CP）及磷酸化CP-1分布与表达的影响。方法给予人晶状体上皮细胞（SRA01/04）不同浓度及不同时间点的 H2O2刺激。用激光共聚焦显微镜和免疫荧光显微镜观察 CP 及磷酸化 CP-1的分布。通过免疫印迹试验观察 CP 表达水平的变化以及磷酸化 CP-1的表达。结果通过激光共聚焦显微镜和荧光显微镜,观察到人晶状体上皮细胞的质膜和细胞质内含有丰富的 CP;当给予细胞 H2O2刺激后,细胞质内 CP 的分布增多;当刺激时间达到1 h,细胞膜被破坏,但仍可观察到 CP 的分布情况。此外,H2O2的刺激可以使 CP-1发生磷酸化。免疫印迹试验发现,随着 H2O2作用时间的延长和刺激浓度的升高,细胞质膜和细胞总蛋白质的 CP 表达水平呈下调趋势。结论 H2O2刺激人晶状体上皮细胞后,CP 重新分布并可能破坏了细胞质膜微囊（eaveolae）的结构,使得细胞的 CP 表达下调。细胞质膜微囊和 CP 可能在人晶状体上皮细胞中具有重要作用。（中华眼科杂志,2007,43:431-436）