干扰素α调控维甲酸诱导基因G表达分子机制的新发现

摘要

目的探讨干扰素α（IFN-α）调控维甲酸诱导基因G（RIG-G）表达调控的分子机制。方法采用Western blot方法检测急性早幼粒白血病细胞系NB4经IFN-α处理后信号传导和转录活化因子1（STAT1）、p-STAT1和RIG-G蛋白的表达变化。采用细胞转染、报告基因实验、免疫共沉淀实验和染色质免疫沉淀实验等技术,研究STAT1缺失的U3A细胞中,STAT1、STAT2和IFN调节因子9（IRF-9）在IFN-α调控RIG-G基因表达中的作用及其机制。结果在U3A细胞中,只有当STAT2和IRF-9共同转染时,RIG-G启动子荧光素酶报告基因的表达活性才明显升高,约为空载对照组的8倍。在无IFN-α作用时,野生型或突变型STAT2与IRF-9共同转染U3A细胞可产生相似的效应;但IFN-α能进一步增强野生型STAT2与IRF-9的转录激活作用,约为未加IFN-α时的6倍,而对突变型STAT2无效。STAT2能与IRF-9相互作用,并能与RIG-G基因的启动子结合。结论 STAT2和IRF-9能以不依赖于STAT1的形式发生相互作用,所形成的复合物是介导IFN-α调控RIG-G基因表达的关键性转录因子,这是一种有别于经典JAK-STAT途径的新的干扰素信号转导方式。