5－氮杂－2’－脱氧胞苷对人肺腺癌裸鼠种植瘤的抑制作用及组织因子途径抑制物2基因甲基化状态和表达的影响

摘要

目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对人肺腺癌裸鼠种植瘤生长的抑制作用,以及对种植瘤组织中组织因子途径抑制物2（TFPI-2）基因甲基化状态和表达的影响。方法建立人肺腺癌A549细胞裸鼠种植瘤模型,按5-Aza-CdR不同剂量分为对照组（未注射5-Aza-CdR）和实验组,其中实验组分为0.5 mg/kg组、1 mg/kg组和2 mg/kg组。比较各组裸鼠种植瘤生长的变化。采用甲基化特异性聚合酶链反应、实时定量荧光聚合酶链反应和Western blot检测5-Aza-CdR对裸鼠种植瘤组织TFPI-2基因甲基化状态、mRNA和蛋白表达的影响。结果用药28 d后处死裸鼠时,0.5 mg/kg组、1 mg/kg组、2 mg/kg组和对照组荷瘤裸鼠体重分别为（26.80±0.18）g、（26.67±0.28）g、（26.50±0.26）g和（27.12±0.38）g,差异无统计学意义（P＆0.05）。0.5 mg/kg组、1 mg/kg组、2 mg/kg组和对照组皮下种植瘤体积分别为（400.67±2.68）mm3、（285.71±2.91）mm3、（230.44±3.15）mm3和（709.22±2.87）mm3,差异有统计学意义（P＆0.05）。对照组TFPI-2基因呈完全甲基化状态,0.5 mg/kg组和1 mg/kg组呈不完全甲基化状态,2 mg/kg组呈非甲基化状态。0.5 mg/kg组、1 mg/kg组、2 mg/kg组和对照组TFPI-2 mRNA的相对表达水平分别为1.67±0.07、3.40±0.24、5.55±0.61和1.00±0.00,差异有统计学意义（P＆0.05）。0.5 mg/kg组、1 mg/kg组、2 mg/kg组和对照组TFPI-2蛋白表达的相对水平分别为0.36±0.01、0.64±0.02、0.81±0.20和0.18±0.02,差异有统计学意义（P＆0.05）。结论 5-Aza-CdR能抑制人肺腺癌裸鼠种植瘤的生长,诱导种植瘤细胞TFPI-2基因的表达,其机制可能为5-Aza-CdR通过去甲基化作用使甲基化的TFPI-2基因重新表达,从而抑制人肺腺癌A549细胞的生长和增殖。