多组分免疫亲和柱净化-高效液相色谱串联质谱法同步测定植物油中7种真菌毒素

摘要

为提高植物油中真菌毒素的检测效率,研制免疫亲和柱,建立检测方法.以纯化的抗黄曲霉毒素(AFT,包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2)、抗玉米赤霉烯酮毒素(ZEA)、抗T-2毒素、抗伏马B1毒素(FB1)的四种单克隆抗体为特异性抓捕元件,通过研究比较3种载体材料和2种抗体偶联方法,成功制备出以CNBr-activated Crystarose 4B作为固相载体材料的真菌毒素多组分免疫亲和柱.同时研究比较了提取溶剂、提取方式和上样缓冲液等条件,并结合高效液相色谱串联质谱技术(HPLC-MS/MS),建立了植物油中7种真菌毒素的同步免疫亲和净化——HPLC-MS/MS检测方法.结果表明,该方法对7种真菌毒素的检测线性范围宽,线性回归方程相关系数(R2)均不低于0.992;对AFB1、AFB2、AFG1、AFG2四种真菌毒素的检出限为0.02 ～0.08 μg/kg,对ZEA、T-2、FB1三种真菌毒素的检出限为0.10～ 0.50μg/kg;添加回收实验中,低、中、高三个不同加标水平下的平均回收率为80.22％～106.10％,相对标准偏差为1.05％ ～ 6.56％.该方法操作简便、净化彻底、回收率高、有机溶剂消耗量少,为食用植物油中真菌毒素多组分同步确证性检测提供了一种高效、准确、灵敏的技术.